細胞培養(yǎng)基是培養(yǎng)環(huán)境中最重要的組成部分,是人工模擬細胞在體內(nèi)生長的營養(yǎng)環(huán)境,主要為細胞提供必要的營養(yǎng)、生長因子和激素等70~100種不同化學成分,并調(diào)節(jié)培養(yǎng)物的pH值和滲透壓。
血清是細胞培養(yǎng)中的一個重要營養(yǎng)來源,可以為細胞提供基本的營養(yǎng)物質(zhì)、細胞增殖所需的生長因子、促接觸和伸展因子、結合蛋白、激素和蛋白酶抑制劑等,因此在細胞培養(yǎng)基中常會添加血清。但血清存在很多問題,如:
(1)動物血清的成分復雜,雖然大部分成分已知,但仍然存在不清楚的成分;
(2)動物血清的成分及含量會因動物性別、年齡、生理狀態(tài)、營養(yǎng)條件不同而存在差異;
(3)不同廠家生產(chǎn)的血清以及同一廠家生產(chǎn)的不同批次的血清間存在質(zhì)量差異。
以上這些問題都會影響細胞培養(yǎng)實驗的可重復性和一致性,制約動物細胞的規(guī)模化培養(yǎng),因此在含血清細胞培養(yǎng)基的基礎上逐漸發(fā)展出了減血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基。
·減血清培養(yǎng)基
在細胞培養(yǎng)實驗中,使用減血清培養(yǎng)基可以減少血清帶來的不良影響。減血清培養(yǎng)基是富含營養(yǎng)物質(zhì)和動物源性因子的基礎培養(yǎng)基配方,可減少所需的血清量。
Gibco™ Opti-MEM™ I減血清培養(yǎng)基是一種改良的MEM培養(yǎng)基(最DI必需培養(yǎng)基),可使胎牛血清添加量減少至少50%,但不影響細胞的生長速率或形態(tài)。Gibco™ Opti-MEM™ I減血清培養(yǎng)基還可用于細胞轉染,比如與Lipofectamine™ 2000或Lipofectamine™ 3000轉染試劑配合使用。Opti-MEM™ I減血清培養(yǎng)基可培養(yǎng)懸浮和貼壁的哺乳動物細胞,包括Sp2、AE-1、CHO、BHK-21、HEK和原代成纖維細胞等。
·Gibco™ Opti-MEM™ I減血清培養(yǎng)基的使用
Gibco™ Opti-MEM™ I減血清培養(yǎng)基包含胰島素、轉鐵蛋白、次黃嘌Ling、胸苷和微量元素等促
進細胞生長的附加成分,這些附加成分可使血清添加量減少至少50%。Gibco™ Opti-MEM™ I減血清培養(yǎng)基使用碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)(2.4 g/L),因此在培養(yǎng)細胞時需要5~10%的CO2環(huán)境來維持pH值。
·cGMP生產(chǎn)和質(zhì)量體系
Gibco™ Opti-MEM™ I減血清培養(yǎng)基在符合cGMP要求且通過ISO13485認證的工廠內(nèi)生產(chǎn)。
北京百奧創(chuàng)新科技有限公司提供Gibco™ Opti-MEM™ I 減血清培養(yǎng)基現(xiàn)貨以及Lipofectamine™ 2000和Lipofectamine™ 3000轉染試劑,具體信息請咨詢百奧創(chuàng)新的客服。