AcceGen是一家美國(guó)生物技術(shù)公司。成立于2016年，位于新澤西州費(fèi)爾菲爾德，AcceGen提供完整和精確的細(xì)胞產(chǎn)品和科研服務(wù)。AcceGen為客戶開(kāi)發(fā)了專有的原代細(xì)胞永生化服務(wù)科研服務(wù)。

Caco-2 (人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)分離自一位72歲男性直腸原位癌，人結(jié)腸癌Caco-2細(xì)胞系在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)條件下匯合后，自發(fā)分化為腸上皮樣細(xì)胞，是常用的腸癌細(xì)胞模型。Caco-2細(xì)胞分離自直腸原位癌；當(dāng)長(zhǎng)到滿時(shí)，Caco-2細(xì)胞表現(xiàn)出特征性的腸上皮細(xì)胞分化。Caco-2細(xì)胞表達(dá)維甲酸結(jié)合蛋白I和維甲酸結(jié)合蛋白Ⅱ，并呈角質(zhì)蛋白陽(yáng)性。下面讓我們一起來(lái)看看AcceGen人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞Caco-2細(xì)胞的培養(yǎng)要點(diǎn)吧！

1. 細(xì)胞不貼壁怎么辦

Caco-2細(xì)胞培養(yǎng)基里添加的胎牛血清比例為20%，當(dāng)血清比例降低，貼壁性下降時(shí)，補(bǔ)充胎牛血清至20%，繼續(xù)培養(yǎng)1-2天，細(xì)胞即可貼壁。檢查培養(yǎng)基是否偏堿（呈紫紅色），偏堿的培養(yǎng)基可能導(dǎo)致細(xì)胞無(wú)法貼壁。

2. 能否用DMEM替代MEM

可以。DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的。Caco-2細(xì)胞在DMEM+20%FBS+1%P/S條件下生長(zhǎng)狀態(tài)正常。

3. MEM中不含NEAA會(huì)怎樣

當(dāng)使用不含NEAA的MEM培養(yǎng)基時(shí)，Caco-2生長(zhǎng)速度可能下降，漂浮細(xì)胞增多。

4. 細(xì)胞消化不下來(lái)怎么辦

如果消化5-10分鐘，細(xì)胞部分脫落，另一部分仍然貼壁緊密，可以將脫落細(xì)胞轉(zhuǎn)移至離心管，向原瓶中加入新的胰酶，放入培養(yǎng)箱繼續(xù)消化剩余細(xì)胞，每隔1min拿出來(lái)觀察，直到細(xì)胞滑落。

5. 漂浮細(xì)胞多怎么辦

有少量發(fā)亮的細(xì)胞漂浮或黏附在細(xì)胞克隆上，是正常的，隨后會(huì)進(jìn)入克隆并正常生長(zhǎng)。所以避免頻繁觀察細(xì)胞，可以減少漂浮細(xì)胞產(chǎn)生。

如果Caco-2細(xì)胞隨著培養(yǎng)過(guò)程，漂浮得越來(lái)越嚴(yán)重，甚至大塊兒飄起，就要檢查培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)環(huán)境是否出現(xiàn)異常了。

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